銳拓應用報告——過濾方式對溶出結果的影響

銳拓溶出儀的客戶在實驗過程中發現手動取樣與自動取樣的結果不一致，銳拓應用技術部以DOE實驗設計協助客戶進行偏差調查。

本文基于此次調查報告（RT-R2005001）改編而成，我們希望通過本文向各位介紹正確的溶出過濾方式。亦歡迎各位關注銳拓儀器的公眾號，在線與我們的技術人員探討您所遇到的問題。

1. 目的

為銳拓客戶提供調查服務，調查L制劑溶出實驗過程中手動取樣與自動取樣不一致的原因，并提供符合GMP要求的調查報告。

2. 實驗參數

溶出裝置：槳法

溶出介質：純水, 900 mL

溫度：37℃ ± 0.5℃

轉速：50 RPM

取樣時間：5，10，15，20，30，45 min

取樣體積：10 mL

柱狀取樣濾芯：孔徑：30 μm

注射式過濾器：聚醚砜（PES）；直徑：25 mm；孔徑：0.45 μm

3. 實驗結果

3.1 手動取樣和自動取樣結果的對比

每個溶出杯均同時進行手動取樣和自動取樣。手動取樣針和自動取樣針前端均安裝柱狀取樣濾芯，后端使用注射式過濾器進行二級過濾。實驗結果顯示，在正確的過濾方式下，手動取樣和自動取樣的釋放度結果基本一致。

3.2 不同手動取樣過濾方式的差異

每個溶出杯同時進行手動取樣，取樣后立即同步使用以下 3 種方式進行過濾：

（1）取樣針前端不安裝柱狀取樣濾芯，使用同一個注射式過濾器過濾所有取樣時間點的樣品。

（2）取樣針前端不安裝柱狀取樣濾芯，每個取樣時間點使用新的注射式過濾器過濾樣品。

（3）取樣針前端安裝柱狀取樣濾芯。后端不使用注射式過濾器。

實驗結果顯示，不同過濾方式的結果差異很大：

（1）取樣針前端不安裝濾芯的溶出結果＞取樣針前端安裝濾芯的溶出結果。

（2）重復使用注射式過濾器的溶出結果＞每次更換注射式過濾器的溶出結果。

4. 結果分析

這里應首先指出，所有過濾方式均經過確認，取樣前過濾器均已經充分飽和，不會吸附樣品的主藥成分。

根據樣品的釋放特征，我們認為造成結果差異的原因是：過濾時，樣品顆粒在注射式過濾器中復溶所致。

樣品進入溶出介質后會迅速崩解，產生大量顆粒，這些顆粒密度較輕，會隨著槳葉的攪動漂散到溶出介質的上層。如果取樣針前端沒有安裝柱狀取樣濾芯，在取樣過程中就很容易抽取到大量的樣品顆粒。

取樣后使用注射式過濾器過濾樣品溶液時，我們一般會先排掉一部分濾液飽和濾頭，此時已經有一部分樣品顆粒積聚在濾頭上。后續把樣品溶液*過濾時，顆粒會繼續在濾頭上積聚。加上樣品釋放速度快，積聚在濾頭上的顆粒會在過濾過程中持續釋放主藥成分，導致收集到的溶液濃度偏大，最終引起溶出結果偏高。

從而，上述的實驗情況就可以進行合理的解析：

（1）重復使用注射式過濾器時，樣品顆粒會持續在同一個注射式過濾器積聚，其積聚程度遠高于每次更換過濾器的情況，從而導致其收集到的溶液濃度更大。即使每次過濾時均舍去前面濾液，也明顯無法排除前期積聚的樣品顆粒持續釋放主藥成分的干擾。

（2）隨著溶出實驗的進行，溶出介質里漂浮顆粒中的主藥成分會逐漸釋放進入溶出介質中。測試時間越長，樣品顆粒中殘留的主藥成分越少，其取樣后堆積在濾頭中復溶出來的主藥成分也越少。所以取樣時間越后，三種過濾方式的差異越少。

唯有同時在取樣針前端安裝柱狀取樣濾芯排除制劑L顆粒的干擾，手動取樣的結果才可以與自動取樣的結果一致。 

5. 結論

不正確的過濾方式可能會過高地估計了藥物的實際溶出效果，高估藥物的體外溶出可能導致仿制藥物在人體內的實際藥物濃度低于預計，增加BE不通過的風險，盡管這種風險僅存在于某些特定藥物中（例如本文中的制劑L）。

基于上述原因，溶出度儀應具有兩級的過濾器設計，以充分降低不能正確過濾所帶來的風險。銳拓儀器RT600系列及RT612系列溶出儀均具有原生二級過濾器設計，以充分支持用戶的溶出度測試工作。